¿Qué es un genoma de referencia?

Un genoma de referencia es la secuencia de ADN ensamblada de un individuo, que sirve de patrón para su especie. Se usa en investigación sobre conservación, ecología, evolución, taxonomía, comportamiento, agricultura y silvicultura.

Se puede comparar con los genomas de otras especies para estudiar cambios en sus genes y cromosomas. También permite alinear datos de lecturas cortas, más económicos, de muchos individuos y analizar parentesco, tamaño y conectividad de las poblaciones, selección natural e intercambio genético.

Tres niveles de datos genómicos

Cada nivel responde preguntas distintas, con un costo distinto.

  1. Cómo un código de barras de ADN identifica una especieUna mariposa de especie desconocida aporta un fragmento corto y estandarizado de ADN. Cada una de sus bases, A, C, G o T, se convierte en una barra de color y forma un código de barras. El código se compara con los de cuatro especies de Heliconius en una biblioteca de referencia. Tres difieren en algunas posiciones, señaladas con cruces; uno es idéntico, así que el ejemplar queda identificado, primero como Heliconius cydno. Un botón trae otra mariposa desconocida y la misma comparación le pone nombre. Se dibujan dieciséis bases; un código de barras animal real tiene unas 650 bases del gen COI.TATTAGGAGCTTCAATH. cydnoSe muestran 16 de unas 650 bases (gen COI)H. hecaleH. ismeniusH. clysonimusH. cydno

    ¿De qué especie es esta mariposa?

    Las 16 bases coinciden con H. cydno. Una cruz marca cada base en la que otra especie difiere.

    Nivel 1

    Códigos de barras de ADN

    Un fragmento corto y estandarizado de ADN, comparado con una biblioteca de referencia, identifica la especie. Es el más económico de los tres niveles.

  2. Cómo la resecuenciación compara poblacionesSe secuencian en lecturas cortas tres mariposas de una población y tres de otra. Las lecturas se alinean a lo largo de un genoma de referencia, una fila por mariposa: la primera población por encima y la segunda por debajo. Se leen cinco sitios, uno tras otro, y cada uno recibe una marca. En dos, las seis mariposas tienen la misma letra. En dos, ambas letras aparecen en las dos poblaciones, así que ese sitio no sirve para distinguirlas. En uno, todas las mariposas de arriba tienen una T y todas las de abajo una C: un sitio donde las dos poblaciones difieren.=≈=≠≈CAGTCCGGTTCAGTCCGGCCCAGCCCAGCT

    ¿Dónde difieren las dos poblaciones?

    • =igual en todas
    • ≈mezclado en ambas
    • ≠distinto

    1 de 5 sitios distingue a las poblaciones: T arriba, C abajo. Los demás son iguales o están mezclados.

    Nivel 2

    Resecuenciación poblacional

    Lecturas cortas de muchos individuos, alineadas a un genoma de referencia, muestran en qué difieren las poblaciones y ayudan a distinguir especies.

  3. Cómo se ensambla un genoma de referenciaEl ADN de una mariposa se secuencia en lecturas largas, que llegan sin ningún orden. Las lecturas que terminan y empiezan con las mismas letras se traslapan, así que pueden alinearse y unirse en una sola secuencia continua. Luego, los datos de Hi-C ordenan los fragmentos unidos y dan una referencia a escala cromosómica con los 21 cromosomas de un Heliconius típico. Es costoso, pero se hace una sola vez por especie: después bastan lecturas cortas, más baratas, alineadas a la referencia.21 cromosomas

    Nivel 3

    Genomas de referencia

    Ensamblajes a escala cromosómica: una secuencia continua por cromosoma en lugar de muchos fragmentos. Sobre ellos se alinean las lecturas resecuenciadas.

Aprender mientras analizamos juntos

Caligo analizará estos genomas en conjunto, así que cada conjunto de datos servirá también para formar. Los cursos y materiales se combinarán con trabajo práctico que reúne a especialistas en genómica con investigadores que quieren aprender.

El trabajo empieza con los primeros proyectos piloto. Para participar, escribe a quienes lideran cada proyecto.

Explora los proyectos piloto propuestos
  1. Hace 3 meses

    Taller de secuenciación en Bogotá

    Bogotá, Colombia

    La primera actividad de la red en América Latina, con la Red Colombiana de Genómica. Durante el taller se secuenciaron ocho especies de Heliconius.

    Proyecto piloto de Heliconius
  2. Dentro de 5 meses

    Hackatón en Campinas

    Campinas, Brasil

    Hackatón durante el congreso Biology of Butterflies y Encuentro de Lepidópteros Neotropicales (ELEN): los participantes ensamblan genomas de referencia y analizan los datos en conjunto.

    Sitio del congreso

Lo que ya revelan los genomas neotropicales

Estos estudios muestran cómo los genomas de referencia y los datos poblacionales revelan cambios cromosómicos, radiaciones rápidas y orígenes híbridos.

De la evidencia publicada a nuevas preguntas

Cuatro hallazgos publicados conducen a los proyectos piloto propuestos por Caligo y muestran lo que podrían revelar nuevas muestras o datos genómicos.

¿Cómo pueden los cromosomas de las mariposas dividirse y fusionarse sin dejar de funcionar?

La mayoría de Heliconius tiene 21 cromosomas; cinco especies del grupo sapho llegan a 60.

El número de cromosomas se mantiene estable durante millones de años en muchos linajes animales. En algunas mariposas y polillas ocurre algo distinto. La mayoría de las especies de Heliconius tiene 21 cromosomas en el juego haploide, pero cinco especies del grupo sapho llegan a 60 después de fisiones repetidas.

Los cromosomas de los lepidópteros son holocéntricos. Durante la división celular, la maquinaria que separa los cromosomas puede unirse a lo largo de todo el cromosoma, en lugar de hacerlo en un solo centrómero. Por eso, un fragmento roto puede conservar esa maquinaria y pasar a una célula hija. Esto puede ayudar a que las fisiones cromosómicas persistan, pero no explica por qué se propagan en una población.

Fisiones cromosómicas con y sin un único centrómeroVeintiún cromosomas, como en la mayoría de Heliconius. Las fisiones se suman una a una y cada una divide un cromosoma en dos, hasta 39 fisiones y 60 cromosomas, el número más alto del grupo sapho. Cuando la maquinaria de división puede unirse a lo largo de todo el cromosoma, como en mariposas y polillas, cada fragmento aún puede pasar a las células hijas. Con un solo centrómero, como en la mayoría de los animales, cada fragmento que queda sin centrómero se pierde. Es una imagen simplificada.60 cromosomas

En el grupo sapho de Heliconius, los estudios genómicos identificaron tres fusiones entre el cromosoma W y autosomas. El W se fusionó con el cromosoma 4 en el ancestro común del grupo. Más tarde ocurrieron dos fusiones independientes, una con el cromosoma 9 y otra con el cromosoma 14, en dos linajes descendientes.

Conoce el estudio propuesto sobre Heliconius
Una mariposa Heliconius sapho posada con las alas negro azuladas abiertas, atravesadas por anchas bandas blancas.

Heliconius sapho, vista dorsal, Colombia. Esta especie pertenece al grupo sapho, que presenta variación cromosómica.

Foto: desertnaturalist / iNaturalist, vía GBIF. · Fuente · CC BY 4.0

¿Siguen conectadas las poblaciones de una mariposa amenazada una década después?

En 2016, la mayoría de las poblaciones restantes aún intercambiaba migrantes.

Parides ascanius está restringida a restingas costeras y humedales del sureste de Brasil. La UICN la evaluó como Vulnerable a nivel global en 2018. La evaluación nacional de Brasil la clasificó En Peligro en 2021.

Seraphim y sus colegas compararon las poblaciones restantes mediante secuencias mitocondriales de COI y ocho marcadores microsatélites. El estudio de 2016 encontró poca estructura genética, ninguna señal de endogamia y una migración alta entre la mayoría de los sitios muestreados, aunque una población estaba más aislada por el entorno metropolitano.

El resultado de 2016 ofrece una línea de base, pero no muestra si las poblaciones siguen conectadas hoy. Un genoma de referencia a escala cromosómica y nuevas muestras de sus poblaciones permitirían medir cuánta diversidad queda y si la pérdida de hábitat, el drenaje o la fragmentación han interrumpido el flujo génico.

Descubre cómo Caligo reevaluaría la conectividad
Una Parides ascanius viva posada con las alas abiertas sobre follaje verde, mostrando anchas bandas blancas y rosadas.

Parides ascanius, vista dorsal, Brasil.

Foto: Pablo Cauã da Silva Toledo / iNaturalist, vía GBIF. · Fuente · CC BY 4.0

¿Cómo se desplazan las plagas y evoluciona la resistencia en los paisajes sojeros?

Polillas de especies muy parecidas pueden diferir en cómo se desplazan y resisten el control.

En los cultivos de soja de Brasil conviven varias especies cercanas de polillas que pueden ser difíciles de distinguir durante el monitoreo. Identificarlas bien es importante porque su movimiento y su resistencia pueden diferir.

Estudios brasileños han detectado cambios en la susceptibilidad a proteínas insecticidas, por lo que cada especie necesita pruebas repetidas. Los datos genómicos permiten distinguir las especies, comparar el movimiento entre poblaciones e identificar variantes asociadas con la resistencia.

Por sí solos, los genomas no miden el daño al cultivo ni demuestran que una variante cause resistencia. Para elegir una respuesta de manejo también se necesitan ensayos de campo, bioensayos, conocimientos agronómicos y observaciones de los productores.

Conoce el estudio propuesto en paisajes sojeros
Hileras de plantas verdes de soja llenan un campo rodeado de árboles en Novo Barreiro, al sur de Brasil.

Campo de soja en Novo Barreiro, Rio Grande do Sul, Brasil.

Foto: Lucas Friederich / Wikimedia Commons. · Fuente · CC BY-SA 4.0

Miles de Panacea prola vuelan hacia el noreste. ¿De dónde vienen?

De 2.509 Panacea prola contadas en Perú, solo 19 no volaban hacia el noreste.

En 2020, Gallice y sus colegas registraron 2.509 individuos de Panacea prola durante cincuenta observaciones de una hora en el sureste de Perú. Solo 19 volaron en otra dirección. Los autores presentaron el hallazgo como la primera evidencia de una migración de insectos en la Amazonía.

La referencia genómica más cercana disponible pertenece a otra especie de la misma subfamilia, Batesia hypochlora. No permite saber de dónde venían las Panacea, si pertenecían a una o varias poblaciones ni si el movimiento se repite cada año.

La comparación de muestras de distintos lugares, temporadas y años permitiría estimar su ascendencia y conectividad. Aun así, los genomas tendrían que combinarse con observaciones de campo, datos ambientales u otras formas de estudiar el movimiento.

Descubre cómo Caligo seguiría la oleada migratoria
Una Panacea prola viva con las alas completamente abiertas, mostrando el dorso azul iridiscente con bandas claras anchas.

Panacea prola, vista dorsal, Perú.

Foto: desertnaturalist / iNaturalist, vía GBIF. · Fuente · CC BY 4.0

Planificar un muestreo responsable

Los planes de muestreo necesitan permisos, registros de los ejemplares, acuerdos sobre cómo compartir los resultados, la formación y otros beneficios, además de un plan para gestionar los datos.

Los requisitos varían entre países, y secuenciar o exportar muestras puede exigir permisos adicionales. El muestreo en tierras de pueblos indígenas requiere su consentimiento. Caligo solo apoyará muestreos con una participación sólida de investigadores locales.